Extracción de ADN y amplificación de secuencias del ITS del ADNr de Ganoderma (Fungi, Basidiomycetes) para su uso en el análisis filogenético

Resumen

Objetivo: Evaluar dos métodos de extracción de DNA en especies de Ganoderma para determinar la efectividad
en la amplificación de fragmentos de ITS de uso en el análisis filogenético.
Materiales y métodos: Se compararon dos técnicas de extracción de ADN (Doyle y Doyle 1987 y Aljanabi y
Martinez 1997) para materiales frescos y de herbario de 19 especies de Ganoderma. Para la amplificación
por PCR de la secuencia completa del ITS se utilizó el par de cebadores (ITS1F e ITS4) de acuerdo con las
condiciones descritas en Guzmán-Dávalos et al. (2003).
Resultados: Las muestras de especímenes frescos presentaron una banda en el gel de agarosa, mientras
que la mayoría de los especímenes de más de siete años no mostraron dicha banda. Sin embargo, a pesar de
la ausencia de banda se logró amplificar la región ITS de especímenes frescos como de herbario.
Conclusiones: Se concluye que los dos métodos son una alternativa para la extracción de ADN de calidad de
especímenes de Ganoderma y su posterior uso en la amplificación de la región del ITS.
Palabras clave: Macromicetos; Caracteres moleculares; Polyporaceae.